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固相合成多肽途徑
固相合成多肽途徑
定點(diǎn)突變
通過(guò)基因工程手段替換引起多肽不穩(wěn)定的殘基或引入能增加多肽穩(wěn)定性的殘基,(固相合成多肽)可提高多肽的穩(wěn)定性。
化學(xué)修飾
多肽的化學(xué)修飾方法很多,研究*多的是PEG修飾。PEG是一種水溶性高分子化合物,低毒 。PEG與多肽結(jié)合后能改善多肽的溶解性,可以進(jìn)行生物相容性調(diào)節(jié),提高熱穩(wěn)定性,抵抗蛋白酶的降解,降低抗原性,延長(zhǎng)體內(nèi)半衰期。選擇合適的修飾方法和控制修飾程度可體質(zhì)或提高原生物活性。
添加劑
通過(guò)加入添加劑,如糖類(lèi)、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類(lèi),可以提高多肽的穩(wěn)定性。糖和多元醇在低濃度下迫使更多的水分子圍繞在蛋白質(zhì)周?chē)蚨岣吡硕嚯牡姆€(wěn)定性。在凍干過(guò)程中,上述物質(zhì)還可以取代水而與多肽形成氫鍵來(lái)穩(wěn)定多肽的天然構(gòu)象,而且還可以提高凍干制品的玻璃化溫度。 此外表面活性劑如SDS、Tween、Pluronic,能防止多肽表面吸附、聚集和沉淀。
凍干
多肽(固相合成多肽)發(fā)生的一系列化學(xué)反應(yīng)如脫酰胺、β-消除、水解等都需要水參與,水還可以作為其它反應(yīng)劑的流動(dòng)相。另外,水含量降低可使多肽的變性溫度升高。因此,凍干可提高多肽的穩(wěn)定性。
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