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多肽固相合成技術(shù)說明
多肽固相合成技術(shù)說明
將固相合成(多肽固相合成)與其他技術(shù)分開來的*主要的特征是固相載體,能用于
多肽合成
的固相載體必須滿足如下要求:必須包含反應(yīng)位點(或反應(yīng)基團),以使肽鏈連在這些位點上,并在以后除去;必須對合成過程中的物理和化學條件穩(wěn)定;載體必須允許在不斷增長的肽鏈和試劑之間快速的、不受阻礙的接觸;另外,載體必須允許提供足夠的連接點,以使每單位體積的載體給出有用產(chǎn)量的肽,并且必須盡量減少被載體束縛的肽鏈之間的相互作用。
用于(多肽固相合成)固相法合成多肽的高分子載體主要有三類:聚苯乙烯-苯二乙烯交聯(lián)樹脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇類樹脂及衍生物,這些樹脂只有導(dǎo)入反應(yīng)基團,才能直接連上(**個)氨基酸。根據(jù)所導(dǎo)入反應(yīng)基團的不同,又把這些樹脂及樹脂衍生物分為氯甲基樹脂、羧基樹脂、氨基樹脂或酰肼型樹脂。BOC合成法通常選擇氯甲基樹脂,如Merrifield樹脂;FMOC合成法通常選擇羧基樹脂如王氏樹脂。氨基酸的固定主要是通過保護氨基酸的羧基同樹脂的反應(yīng)基團之間形成的共價鍵來實現(xiàn)的,形成共價鍵的方法有多種:氯甲基樹脂,通常先制得保護氨基酸的四甲銨鹽或鈉鹽、鉀鹽、銫鹽,然后在適當溫度下,直接同樹脂反應(yīng)或在合適的有機溶劑如二氧六環(huán)、DMF或DMSO中反應(yīng);羧基樹脂,則通常加入適當?shù)目s合劑如DCC或羧基二咪唑,使被保護氨基酸與樹脂形成共酯以完成氨基酸的固定;氨基樹脂或酰肼型樹脂,卻是加入適當?shù)目s合劑如DCC后,通過保護氨基酸與樹脂之間形成的酰胺鍵來完成氨基酸的固定。
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