人臍靜脈細胞融合細胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在進行血管內(nèi)皮細胞實驗時，通常選用的細胞模型為人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells，簡稱HUVECs)。而不是直接采用靜脈血管內(nèi)皮細胞或動脈血管內(nèi)皮細胞。原因是臍靜脈內(nèi)皮細胞具有干細胞的潛能，理論上可以傳代50-60次。

消化細胞

　　消化液：用pH7.0-7.2的PBS或D-Hank’S液，分別配制0.25%胰酶液和0.02%EDTA-Na2液，用前按1：1混合。在細胞(人臍靜脈細胞融合細胞)傳代或凍存前先消化細胞。具體操作如下：吸凈培養(yǎng)液，每瓶加消化液1ml，搖勻使其布滿培養(yǎng)瓶細胞面。37℃消化2-5分鐘。顯微鏡下看細胞回縮成圓形后，輕輕震動使絕大部細胞脫落后，每瓶加含10%FBS的RPMI-1640液的中和液4-5ml中和胰酶的消化作用，并用吸管輕輕吹打培養(yǎng)面使細胞完全脫落后，吸至15ml無菌離心管內(nèi)。4℃1500rpm離心10分鐘棄上清，再用中和液洗滌細胞，離心棄上清，加適量RPMI-1640液，混勻后取10ul 細胞懸液加10ul臺盼藍混勻后作細胞計數(shù)，按需要做步驟四或五。

細胞傳代

　　方法同步驟二。

細胞凍存

　　調(diào)整細胞數(shù)2-5×10個/ml，按含細胞的RPMI-1640液ml數(shù)，配制等量的凍存液。凍存液中FBS占80%，DMSO占20%。例：含細胞的RPMI-1640液為8ml，應(yīng)配凍存液8ml，其中FBS為6.4ml,DMSO為1.6ml，混勻。置細胞懸液于冰浴中，逐滴加入凍存液，邊加邊搖動。加完后用吸管吹打混勻。于冰浴中分裝細胞于凍存管中，1.8ml/管，再將凍存管置于凍存盒內(nèi)置-80℃冰箱，24小時后轉(zhuǎn)入液氮中保存。

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