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固相合成多肽的特征
固相合成多肽的特征
將固相合成(固相合成多肽)與其他技術(shù)分開(kāi)來(lái)的*主要的特征是固相載體,能用于
多肽合成
的固相載體必須滿足如下要求:必須包含反應(yīng)位點(diǎn)(或反應(yīng)基團(tuán)),以使肽鏈連在這些位點(diǎn)上,并在以后除去;必須對(duì)合成過(guò)程中的物理和化學(xué)條件穩(wěn)定;載體必須允許在不斷增長(zhǎng)的肽鏈和試劑之間快速的、不受阻礙的接觸;另外,載體必須允許提供足夠的連接點(diǎn),以使每單位體積的載體給出有用產(chǎn)量的肽,并且必須盡量減少被載體束縛的肽鏈之間的相互作用。
用于固相合成多肽的高分子載體主要有三類:聚苯乙烯-苯二乙烯交聯(lián)樹(shù)脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇類樹(shù)脂及衍生物,這些樹(shù)脂只有導(dǎo)入反應(yīng)基團(tuán),才能直接連上(**個(gè))氨基酸。根據(jù)所導(dǎo)入反應(yīng)基團(tuán)的不同,又把這些樹(shù)脂及樹(shù)脂衍生物分為氯甲基樹(shù)脂、羧基樹(shù)脂、氨基樹(shù)脂或酰肼型樹(shù)脂。BOC合成法通常選擇氯甲基樹(shù)脂,如Merrifield樹(shù)脂;FMOC合成法通常選擇羧基樹(shù)脂如王氏樹(shù)脂。氨基酸的固定主要是通過(guò)保護(hù)氨基酸的羧基同樹(shù)脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成的共價(jià)鍵來(lái)實(shí)現(xiàn)的,形成共價(jià)鍵的方法有多種:氯甲基樹(shù)脂,通常先制得保護(hù)氨基酸的四甲銨鹽或鈉鹽、鉀鹽、銫鹽,然后在適當(dāng)溫度下,直接同樹(shù)脂反應(yīng)或在合適的有機(jī)溶劑如二氧六環(huán)、DMF或DMSO中反應(yīng);羧基樹(shù)脂,則通常加入適當(dāng)?shù)目s合劑如DCC或羧基二咪唑,使被保護(hù)氨基酸與樹(shù)脂形成共酯以完成氨基酸的固定;氨基樹(shù)脂或酰肼型樹(shù)脂,卻是加入適當(dāng)?shù)目s合劑如DCC后,通過(guò)保護(hù)氨基酸與樹(shù)脂之間形成的酰胺鍵來(lái)完成氨基酸的固定。
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