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固相合成多肽的固定技術
固相合成多肽的固定技術
將固相合成與其他技術(固相合成多肽)分開來的*主要的特征是固相載體,能用于
多肽合成
的固相載體必須滿足如下要求:必須包含反應位點(或反應基團),以使肽鏈連在這些位點上,并在以后除去;必須對合成過程中的物理和化學條件穩(wěn)定;載體必須允許在不斷增長的肽鏈和試劑之間快速的、不受阻礙的接觸;另外,載體必須允許提供足夠的連接點,以使每單位體積的載體給出有用產量的肽,并且必須盡量減少被載體束縛的肽鏈之間的相互作用。
用于固相法合成多肽(固相合成多肽)的高分子載體主要有三類:聚苯乙烯-苯二乙烯交聯(lián)樹脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇類樹脂及衍生物,這些樹脂只有導入反應基團,才能直接連上(**個)氨基酸。根據(jù)所導入反應基團的不同,又把這些樹脂及樹脂衍生物分為氯甲基樹脂、羧基樹脂、氨基樹脂或酰肼型樹脂。BOC合成法通常選擇氯甲基樹脂,如Merrifield樹脂;FMOC合成法通常選擇羧基樹脂如王氏樹脂。氨基酸的固定主要是通過保護氨基酸的羧基同樹脂的反應基團之間形成的共價鍵來實現(xiàn)的,形成共價鍵的方法有多種:氯甲基樹脂,通常先制得保護氨基酸的四甲銨鹽或鈉鹽、鉀鹽、銫鹽,然后在適當溫度下,直接同樹脂反應或在合適的有機溶劑如二氧六環(huán)、DMF或DMSO中反應;羧基樹脂,則通常加入適當?shù)目s合劑如DCC或羧基二咪唑,使被保護氨基酸與樹脂形成共酯以完成氨基酸的固定;氨基樹脂或酰肼型樹脂,卻是加入適當?shù)目s合劑如DCC后,通過保護氨基酸與樹脂之間形成的酰胺鍵來完成氨基酸的固定。
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