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胃上皮細胞(貂肺上皮細胞)的培養(yǎng)

胃上皮細胞(貂肺上皮細胞)的培養(yǎng)
  1.取材:(貂肺上皮細胞)取胃潰瘍或胃癌手術(shù)切除胃標(biāo)本遠端非病變區(qū)粘膜少許。
  2.清洗:用含慶大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用鈍器剝離下粘膜,剪成1mm3大小。
  3.消化:在I型膠原酶和透明質(zhì)酸酶中,于37℃中消化80分鐘。
  4.離心:收集細胞懸液,800轉(zhuǎn)/分離心后,Hanks液漂洗兩次。
  5.接種:末次離心后加入含有1%~2%胎牛血清的完全培養(yǎng)基,接種入不同孔數(shù)的培養(yǎng)板中,接種量依不同實驗?zāi)康亩ā?/div>
  肝細胞培養(yǎng)
  初代組織塊培養(yǎng)(貂肺上皮細胞):取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養(yǎng)法。

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